核酸染(ran)料(liao)是分子生物學實(shi)驗中(zhong)不可或缺的試劑(ji),其(qi)中(zhong)。
紫外(wai)光與EtBr染色(se)至今仍一起被(bei)用于分子生物學實驗(yan)室中檢測核酸。然而紫外光譜會導致DNA樣品的(de)修(xiu)飾(shi)和降解,30秒的(de)紫(zi)外線曝光足以大幅降低克隆(long)效率。藍/綠LED在470 nm - 520 nm處發出(chu)安全(quan)可見光(guang),這種光譜對 DNA 沒有破壞性(xing),與紫外光相比,DNA完整性(xing)和克隆/測(ce)序效率(lv)完全不受影(ying)響(xiang),即使在(zai)長(chang)時(shi)間的光照下也是如此(ci)。MIDORIGreen系列核(he)酸染(ran)料經過優化,可在紫外光或(huo)藍/綠光激發(fa)時獲得更亮的信號,同(tong)時也兼容紫外光。
圖1:EtBr和MIDORIGreen吸收光譜對比
MIDORIGreen產品特點
? 出色(se)的(de)信號(hao)質(zhi)量
? 用于凝(ning)膠內染(ran)色和后(hou)染(ran)色的安全(quan)核酸染料
? 溴化乙錠的安全替代品:非致(zhi)癌無毒
? 適用dsDNA、ssDNA或(huo)RNA染(ran)色
? 膠染法(fa)和泡染法(fa)均(jun)可(ke)
MIDORIGreen Advance
MIDORIGreen Advance靈(ling)敏度與(yu)EtBr相當,可以直接(jie)添(tian)加(jia)到熔融的瓊脂糖中。同時兼(jian)容紫外(wai)線或藍/綠LED,因(yin)此無需(xu)更改原有的實驗步驟(zou)。MIDORIGreen Advance的稀(xi)釋倍(bei)數可高達(da)1:25000。100 mL瓊(qiong)脂糖(tang)凝膠只需4μL至6μL,每1mL的染料可配置約17L至(zhi)25L瓊(qiong)脂糖凝膠。
MIDORIGreen Direct
MIDORIGreen Direct中已(yi)經包含(han)10X Loading Buffer,可以直接添加到(dao)核(he)酸樣品(pin)中,無需(xu)將其(qi)或(huo)任何(he)其(qi)他染料添加到凝膠(jiao)基質。相(xiang)較于在凝膠中添加染(ran)(ran)料(liao)的染(ran)(ran)色方式,核酸的直接染色(se)消除了(le)背景(jing)染色,提供了(le)完美(mei)的(de)信噪比。1 mL的 MIDORIGreen Direct足(zu)夠(gou)提供1,000至2,000個樣品的染色(se)。
MIDORIGreen Direct可(ke)以為下游提供更好的結果。
從(cong)瓊脂糖凝膠(jiao)中分離核(he)酸(suan)可以進一(yi)步下游(you)應(ying)用,許(xu)多染料,如EtBr甚至SYBR? Green,由于(yu)其(qi)嵌入特性,都是強酶抑制劑。而MIDORI Green 染料與 DNA 骨架結合(he)的方式能(neng)為下游應用帶來(lai)更高的(de)效率,包括(kuo)克隆、測(ce)序、PCR等。
MIDORIGreen Xtra是(shi)NIPPON GENETIC最新一(yi)代核酸染料(liao),針(zhen)對藍/綠LED和(he)藍LED光(guang)源(yuan)進(jin)行(xing)了優(you)化,可以在瓊脂糖凝膠(jiao)中產生強(qiang)熒光(guang)信號(hao)。同時MIDORIGreen Xtra不會對(dui)瓊脂糖凝膠進行染色,因而(er)具(ju)有很低的(de)背景(jing)(jing)噪(zao)音,從而獲得(de)出色的(de)信噪(zao)比。由于非常(chang)低的(de)背景(jing)(jing)熒光(guang),這(zhe)使得(de)識別少量 DNA 變(bian)得(de)非常容易,因此MIDORIGreen Xtra具有超高靈敏(min)度。
圖3:使用MIDORI Green Xtra檢測(ce)的DNA條帶具有超高靈(ling)敏度(注:左圖使用藍(lan)色/綠色(se) LED 透(tou)射(she)儀(yi)進行檢測;右圖(tu)使用(yong)藍色(se)LED透(tou)射(she)儀(yi)進行檢測。)
MIDORIGreen easy
MIDORIGreen easy具有(you)與MIDORIGreen Xtra相同(tong)的出(chu)色(se)信(xin)號質量和低背(bei)景(jing),擁(yong)有(you)比EtBr更好的信(xin)號,MIDORIGreen easy的開發(fa)是(shi)為了可(ke)以輕松替換SYBR®safe,同時染色方案(an)不需要(yao)改變。MIDORIGreen Easy的(de)稀釋倍數可高達1:10000,100 mL瓊脂糖凝(ning)膠只需8μL至10μL。
圖4:MIDORIGreen easy(左(zuo))與(yu)MIDORIGreen Xtra(右)使用藍/綠(lv) LED 激發燈。
MIDORIGreen系(xi)列檢(jian)測光譜與靈敏度
產品 |
藍/綠(lv)LED |
藍LED |
UV-Light |
靈敏度 |
MIDORIGreen Advance |
√ |
√ |
? |
+ |
MIDORIGreen Direct |
√ |
√ |
? |
+ + |
MIDORIGreen Xtra |
√ |
√ |
? |
+ + + |
MIDORIGreen Easy |
√ |
√ |
√ |
+ + |
注(zhu): √表示兼容(rong);?表示兼容但(dan)不(bu)推薦;
MIDORIGreen核(he)酸染料(liao)系列產品列(lie)表(biao)
貨號 |
品(pin)名 |
規格 |
MG04 |
MIDORIGreen Advance |
|
MG06 |
MIDORIGreen Direct (含loading buffer) |
1 ml (10x conc. -可直接添(tian)加樣品) |
MG10 |
MIDORIGreen Xtra |
1 ml (25.000x -可染(ran)色25L凝膠(jiao)) |
MG12 |
MIDORIGreen Easy |
0.4 ml (10.000x -可染(ran)色4L凝膠) |
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