胰蛋白酶，作為絲氨酸蛋白酶家族的一部分，是一種肽鏈內切酶，能夠在賴氨酸和精氨酸的C端精確切割肽鏈。這種生物原材料在生物制品的生產過程中具有廣泛的應用價值。在細胞培養過程中，胰蛋白酶可分解細胞間的粘蛋白和糖蛋白，使得細胞之間能夠彼此分離，從而順利進行傳代培養；在病毒類疫苗的生產過程中，在病毒培養階段加入適量胰蛋白酶，以促使病毒抗原暴露并與細胞受體結合，從而提高了病毒感染效率；在重組蛋白制品的生產中，如重組胰島素的生產，胰蛋白酶也被用作剪切酶，將胰島素原轉化為具有生物活性的胰島素，這不僅提高了胰島素的產量，而且保證了胰島素的生物活性。

   當前使用較廣泛的胰酶是從動物胰臟浸出液中提純凍干后制備而成的，其原料主要來自豬或牛的胰臟。盡管動物源胰酶制備過程中采用了適當的純化工藝，但由于動物本身可能攜帶多種病毒，如瘋牛病病毒、朊病毒、豬瘟病毒等，加上受到制備工藝、生物原材料的特性和當前檢測手段的限制，動物源胰酶存在較高的外源病毒污染風險，可能對生物制品的安全性造成影響。使用重組生物原料替代動物源原料是生物制品生產的主要安全和風險控制手段，中國藥典2020版也收錄了重組胰蛋白酶的質量標準，并且隨著DNA重組技術的不斷發展，生物技術藥物優勢越來越明顯，對重組胰蛋白酶的需求也將不斷增加，據廣州恒州誠思信息咨詢有限公司發布的《2022年全球及中國重組胰蛋白酶行業頭部企業市場占有率及排名調研報告》顯示，2021年中國重組胰蛋白酶市場銷售收入達到了651萬美元，預計2028年可以達到1137萬美元，2022-2028期間年復合增長率(CAGR)為8.22%。

監管(guan)相關文件及(ji)政策

   國家藥監局(ju)于2019年9月發布了《疫苗上市后生產工藝變(bian)更(geng)研究技(ji)術指導原則》（征求意見稿），如果疫苗生產要進行符合藥典(dian)標準的(de)原輔料變(bian)更(geng)，只需備(bei)案，即通(tong)過變(bian)更(geng)流程(cheng)的(de)簡化，鼓勵(li)企業進(jin)行(xing)無動物源(yuan)性原輔料的變更。

   中(zhong)(zhong)國藥典2020版三部“生物制(zhi)品病毒安(an)全性控制(zhi)”章節中(zhong)(zhong)明(ming)確指出(chu)：“原(yuan)(yuan)材(cai)料(liao)及輔(fu)料(liao)應符(fu)合‘生物(wu)制品生產(chan)用(yong)原(yuan)(yuan)材(cai)料(liao)及輔(fu)料(liao)質(zhi)量控制’的相應要求，應盡可能選(xuan)擇無病毒(du)安全性(xing)風險或低風險的原(yuan)(yuan)材(cai)料(liao)和(he)輔(fu)料(liao)用(yong)于生物(wu)制品生產(chan)，如選(xuan)擇采用(yong)重組技(ji)術生產(chan)的生物(wu)材(cai)料(liao)替代動(dong)物(wu)源性(xing)生物(wu)材(cai)料(liao)”，并增加了重組胰蛋白酶的質量(liang)標準(zhun)（中國藥(yao)典2020年版3603）。相關實驗數據

圖1 .無動物成分的rTrypsins具有與天然Trypsin相同的細(xi)胞分離效(xiao)果。

圖2A . Vero細胞(bao)形態學顯示(shi)Sheffield?rTrypsin比其(qi)他市(shi)售重組胰蛋白酶分離細胞快。

圖2B. Sheffield rTrypsin比其他市售重組胰蛋(dan)白(bai)酶解(jie)離細胞時間更短。

圖3 . Sheffield?rTrypsin和其他市售(shou)重組胰蛋白酶(mei)均未發現明顯毒性。

圖4 . 所有rTrypsins消化傳(chuan)代后的細(xi)胞倍(bei)增(zeng)水平顯示這些rTrypsins對細(xi)胞沒有明(ming)顯毒性(xing)。

    實驗(yan)結果顯示，所有的(de)胰(yi)蛋(dan)白酶(mei)在都能有效地分離單層細(xi)胞(bao)(bao)，表(biao)明rTrypsin可以(yi)代替(ti)天然胰(yi)蛋(dan)白酶(mei)進行細(xi)胞(bao)(bao)分離(圖1 )。然而，這些被評估的(de)胰(yi)蛋(dan)白酶(mei)都不(bu)能完(wan)全分離緊密的(de)細(xi)胞(bao)(bao)團塊。在消化單細(xi)胞(bao)(bao)層所需(xu)的(de)時間方面，與其它商品化rTrypsin相比，Kerry Sheffield? rTrypsin酶解(jie)速度更快(圖2A & B )。細(xi)(xi)胞(bao)毒性研(yan)究表明(ming)(ming)(ming)，所(suo)有市售rTrypsins的細(xi)(xi)胞(bao)活率和細(xi)(xi)胞(bao)倍(bei)增(zeng)時間均相近(jin)，表明(ming)(ming)(ming)重組胰蛋白酶對細(xi)(xi)胞(bao)無(wu)明(ming)(ming)(ming)顯毒性(圖3、4 )。

Kerry Sheffield?rTrypsin ACF重組胰蛋(dan)白酶的優點：

• 安全：無動物(wu)源成分，避免了外源病毒(du)污(wu)染風(feng)險，保障了生物(wu)安全性。
• 高效(xiao)：多種細(xi)胞(bao)類型適用，且消化效(xiao)率(lv)(lv)高、溫和，不傷細(xi)胞(bao)，提高細(xi)胞(bao)培養效(xiao)率(lv)(lv)和成功率(lv)(lv)。
• 穩(wen)定(ding)：基(ji)因序列來(lai)自微生(sheng)物胰酶，室溫放置一個(ge)月不會(hui)降(jiang)低活性(xing)，穩(wen)定(ding)性(xing)強。
• 簡(jian)便：實驗操作簡(jian)便，無需洗細(xi)胞(bao)表(biao)面和(he)添加胰酶(mei)抑(yi)制劑，節省時間提高(gao)效率。

Kerry Sheffield?rTrypsin ACF產品(pin)列(lie)表(biao)

免費試用申請

為了(le)滿足廣大客(ke)戶的(de)需求，Sheffield? rTrypsin ACF免費試用活動(dong)已開(kai)啟，即日起至2023年12月31日，關注“西美杰微信公眾號（微信號xmjsci）”，發送關鍵詞“重組胰酶”，填寫試用調查問(wen)卷(juan)即(ji)可獲得免費試用機會，數量有(you)限，先到先得。

美國Kerry集團(tuan)旗(qi)下Sheffield Bio-Science服務于全球(qiu)(qiu)超過70年，作為全球(qiu)(qiu)生(sheng)物制藥(yao)(yao)疫(yi)(yi)苗行業規模大(da)專業性強的細胞(bao)營養原(yuan)料(liao)供(gong)(gong)應商，已成(cheng)為全球(qiu)(qiu)單個藥(yao)(yao)物年銷售額(e)超過10億美金(jin)的10個“生(sheng)物炸彈藥(yao)(yao)”中7個生(sheng)物藥(yao)(yao)的培養基原(yuan)料(liao)供(gong)(gong)應商，是全球(qiu)(qiu)少有(you)的同時生(sheng)產(chan)酵母粉和蛋白胨(dong)并(bing)針對不(bu)同細胞(bao)株/菌(jun)種開發提供(gong)(gong)非動物源性復合添加物系統(tong)的生(sheng)產(chan)商，引領(ling)全球(qiu)(qiu)制藥(yao)(yao)、疫(yi)(yi)苗、無血(xue)清培養基、傳統(tong)發酵和診斷培養基工(gong)業的發展。

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