1、Mirus廣譜DNA轉染試劑TransIT®-LT1、TransIT®-2020和TransIT-X2®三者的區別是什么?

2、TransIT®-LT1轉染試劑的主要成分是什么?

3、TransIT®-2020轉染試劑的主要成分是什么？

4、TransIT®-2020適用于轉染哪些細胞？

5、ransIT-X2® Dynamic Delivery System的主要成分是什么？

6、TransIT-X2® Dynamic Delivery System和PEI（Polyethyeleneimine）是類似的東西嗎？

7、TransIT-X2®可用于貼壁和懸浮細胞轉染嗎？

8、TransIT-X2®可以轉染原代細胞嗎？

9、TransIT-X2®可以轉染神經細胞嗎？

10、抗生素會影響轉染試劑的作用嗎？

11、如何優化轉染效率？

12、轉染結果不理想時該怎么辦？

1、Mirus廣(guang)譜DNA轉染試劑TransIT®-LT1、TransIT®-2020和TransIT-X2®三者的區別是什么?

TransIT®- LT1、TransIT®-2020和TransIT-X2®都是高效的廣譜(pu)轉(zhuan)染(ran)試劑(ji)，但它們的化(hua)學(xue)性(xing)質不同，三者特點(dian)見下表。TransIT-X2是首選用于(yu)高(gao)效基因表達及敲除的廣(guang)譜轉染試劑(ji)。TransIT-X2能(neng)高效(xiao)地轉染質(zhi)粒DNA和(he)siRNA，也可(ke)用于二者(zhe)共轉。TransIT®-LT1和TransIT®-2020僅適用(yong)于質粒(li)DNA的轉染。TransIT®-2020和TransIT-X2®都(dou)是(shi)無動物(wu)源(yuan)成分配方，因(yin)此可滿足有條件限制的應用需求，例(li)如(ru)藥物(wu)開發(fa)等(deng)。對(dui)于不同的細胞類(lei)型，不同轉染試(shi)劑表(biao)現效(xiao)果也有所不(bu)同，因此對于(yu)不(bu)同細胞類型的具體(ti)應用(yong)，可以參考我們的轉染試劑推薦方案(an)數據庫。（//www.mirusbio.com/tech-resources/transfection-database）

*注：目的基因敲除也可以通過轉染編碼(ma)shRNA的質粒DNA來(lai)實現，但該方法敲(qiao)除(chu)基(ji)因不如(ru)siRNA/miRNA高效。

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2、TransIT®-LT1轉染試劑的主要成分是什么?

TransIT®-LT1是一種非脂質體的廣(guang)譜轉染試劑，主要配(pei)方是由(you)脂質及蛋白/聚胺混(hun)合物組成。它是市面(mian)上(shang)第一(yi)款脂類/聚合(he)物復合(he)配(pei)方轉(zhuan)染試劑，同(tong)時具備高轉(zhuan)染效率和低細胞(bao)毒(du)性特征。

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3、TransIT®-2020轉染試劑的主要成分是(shi)什么？

TransIT®-2020是一種專利(li)的脂類-聚合物混合配方轉染試(shi)劑，可與DNA形成多聚物脂復合物。TransIT®-2020配方(fang)中不含任何動物源(yuan)成分。

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4、TransIT®-2020適(shi)用于(yu)轉染哪(na)些細胞？

TransIT®-2020是廣譜轉染試劑，適(shi)用(yong)于轉染多種類型細(xi)胞。

· 細胞系，包括貼壁細胞和懸(xuan)浮細胞（例(li)如HepG2, MCF-7, Neuro-2a，K562，Jurkat等）點擊右(you)側鏈(lian)接可以(yi)查(cha)看適用TransIT®-2020轉染的細胞系類型，

· 原代細(xi)胞(bao)和(he)干細(xi)胞(bao)。

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5、TransIT-X2® Dynamic Delivery System的主要(yao)成分是什(shen)么(me)？

TransIT-X2® Dynamic Delivery System是一種(zhong)先進的非脂質體(ti)轉染系統(tong)，由一種(zhong)全新(xin)型聚(ju)合物(wu)搭配Mirus專利配方，更(geng)容易與(yu)核酸形成復(fu)合物，適用于質粒(li)DNA與(yu)小分子(zi)核酸如siRNA、miRNA、pre-miRNA等的高效轉染。此外，TransIT-X2®還(huan)能(neng)實現質粒DNA與siRNA共(gong)轉染。TransIT-X2®配方中(zhong)不含任(ren)何(he)動物源成分。

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6、TransIT-X2® Dynamic Delivery System和PEI（Polyethyeleneimine）是類似(si)的東(dong)西嗎？

不是的。TransIT-X2®是一種全新的聚合(he)物配方，并非基于(yu)PEI的改良產品。

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7、TransIT-X2®可用于貼壁(bi)和懸浮細胞轉染嗎？

可以。經測試(shi)，我們已經用TransIT-X2成功轉染過(guo)多種貼(tie)壁細胞（如CHO-K1，HepG2，原(yuan)代人乳腺上皮細胞等）和懸浮細胞（如Freestyle 293-F等）。

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8、TransIT-X2®可以轉染原(yuan)代(dai)細胞嗎？

可以。TransIT-X2®適(shi)用于轉染多種原(yuan)代細胞，我們已經測試過HUVECs，原(yuan)代人乳(ru)腺(xian)上皮細(xi)胞（HMEC）以及正常人皮膚成(cheng)纖維細胞(bao)（NHDF）等原代(dai)細胞轉(zhuan)染(ran)效率都不錯。

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9、TransIT-X2®可(ke)以轉染神經細(xi)胞嗎？

可以。我(wo)們(men)測試過iCell® Neurons, SH-SY5Y, SK-N-MC and PC-12等神經細胞轉染效率(lv)都很(hen)不錯。點擊右側(ce)鏈接可以查看適用TransIT-X2®轉(zhuan)染的細胞類型以及推薦用(yong)量(liang)。

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10、抗生素會影響(xiang)轉(zhuan)染試(shi)劑的作用嗎(ma)？

某些(xie)抗生素(su)如卡那霉素(su)是陽離(li)子，會抑(yi)制轉(zhuan)染(ran)試劑/核酸形(xing)成(cheng)復(fu)合(he)物，因此我們(men)建(jian)議在轉染試劑復(fu)合(he)物形(xing)成(cheng)這一環節不(bu)要使用(yong)抗(kang)生素。待轉染試劑復合物形成后，我(wo)們(men)就(jiu)可以(yi)加入到含(han)有(you)低水(shui)平(ping)抗生素的完全細胞培養基里了（例如將100×青-鏈霉素雙抗稀釋(shi)到0.1-1×工作濃(nong)度的細(xi)胞培養(yang)基）。

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11、如何優化轉(zhuan)染效率(lv)？

1）      轉染時的細胞(bao)密(mi)度 (%) ：大多數(shu)細胞在轉染(ran)時細胞密度最好(hao)能達(da)到40%-80%，但是不(bu)同類型細胞有其最佳(jia)的(de)轉染密(mi)度，在優化轉染效率(lv)時要先(xian)確認(ren)細胞的最(zui)佳轉(zhuan)染(ran)密度；

2）      轉染(ran)試劑與DNA比例：轉染試劑與DNA的使用比例通常是1-4ul每(mei)1ugDNA，不(bu)同細胞可根據(ju)實際轉染效率(lv)進行不(bu)同配(pei)比的優化；

3）      DNA質粒的質量：轉染用的DNA必須是無菌，高(gao)濃度，且(qie)去除內毒(du)素的(de)質粒。Mirus有一款內毒素去(qu)除試(shi)劑盒（MiraCLEAN® Endotoxin Removal Kit，貨號(hao)MIR5900/MIR5910）可以去除質粒中殘存的內毒素；

4）      轉染試劑與核酸形成復合物(wu)要在(zai)無血清的培養基中(zhong)進行：血清(qing)可能會干(gan)擾(rao)轉染試劑(ji)與(yu)核(he)酸(suan)形(xing)成(cheng)復合物(wu)，因此在配置轉染試劑與(yu)核(he)酸(suan)復合物時需(xu)要用(yong)無血(xue)清、無抗生素的培養基，而將復合(he)物加入細胞(bao)的時候，細胞(bao)培養基里是(shi)可以含血清(qing)的。

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12、轉染(ran)結果不理想時該(gai)怎么辦？

Mirus每款(kuan)轉(zhuan)染(ran)試(shi)劑的說明書最后都有TROUBLESHOOTING GUIDE，可以幫助客戶對照結果(guo)查找問題原(yuan)因(yin)，大部分(fen)轉染不理想的(de)問題都可以通過優化操作步驟來解決，因(yin)此每一(yi)個使用Mirus轉(zhuan)染試劑的客戶(hu)，都應在(zai)轉染前(qian)認真閱讀產品說明(ming)書。

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