生(sheng)物制(zhi)品中的(de)宿主細(xi)胞殘留蛋(dan)白會導致過(guo)敏(min)反(fan)應或潛(qian)在毒性(xing)等(deng)不良臨床反(fan)應風險。因(yin)此必須(xu)建(jian)立合(he)適的(de)HCP檢測驗證方法(fa)來嚴格控(kong)制(zhi)生物制(zhi)品的質量。目前生物制(zhi)品行(xing)業多(duo)以商業化的通用型HCP ELISA試劑盒來檢測產(chan)品(pin)中的(de)宿主蛋白殘留（如Cygnus Technologies）。但宿主(zhu)細(xi)胞(bao)的(de)(de)分(fen)泌型蛋(dan)白和(he)部分(fen)死亡(wang)細(xi)胞(bao)釋放的(de)(de)結構蛋(dan)白成分(fen)復雜，不同的(de)(de)工(gong)藝，加上相關基因產物需(xu)要經過獨特的(de)(de)翻譯后(hou)修(xiu)飾，這些都(dou)大(da)大(da)增加了HCP的品種數量和(he)生化復雜性。因此，通用型(xing)商品化HCP ELISA試劑盒中(zhong)的多克隆抗體對宿主殘留蛋白的特異性問(wen)題很難進行評估。若商(shang)品化ELISA試劑盒(he)中的多克隆抗體(ti)特異性和適用性不夠高，則會帶來(lai)漏檢HCP的(de)風險，從而對生物(wu)制品質(zhi)量安全帶來風險。
因此(ci)，世(shi)界各地的監管部門比如(ru)FDA，CFDA對生物(wu)制品(pin)企業使用的商(shang)品(pin)化(hua)HCP ELISA試劑盒需要提供相關證明，需要證明該ELISA試劑盒(he)中使用(yong)的抗體(ti)與已知工藝流程(cheng)中發現的大量HCPs可以廣泛反應，即試劑盒適用性或(huo)抗原(yuan)覆蓋率驗證。在(zai)申報臨床實(shi)驗時每個(ge)企業都需要提供相關的數(shu)據(ju)來(lai)證明這一點，進而繼續進行(xing)接下來(lai)的研發工作(zuo)。
目前(qian)，做(zuo)此項(xiang)驗證(zheng)，被廣泛認知的方法是傳統2D-WB法，是基于(yu)等電點和分子量不同(tong)的原理，蛋白在凝(ning)膠上(shang)通(tong)過(guo)SDS-PAGE方(fang)法被分離。其中(zhong)一(yi)張(zhang)膠被銀染(ran)，另一(yi)張(zhang)被轉到PVDF膜上(shang)，并(bing)結合ELISA試劑(ji)盒(he)中的抗體進行Western Blotting檢測。兩張圖片通過電子手段進行疊加，然(ran)后由(you)計算機分析覆蓋(gai)率。由(you)于在實驗方法上存在一定局限性(xing)，有一些無法避免的缺陷。
2D-WB法的局限性
? 靈敏度低，只(zhi)適(shi)用于上游樣品的(de)分(fen)析；
? 樣品需要經過變(bian)性處理，一些表位可能會被破壞而不能被抗體識別；
? 銀染的膠與WB膜(mo)只(zhi)能通過(guo)人(ren)(ren)工匹配操作，存在人(ren)(ren)為誤差(cha)；
? 銀染與WB的靈敏度(du)本身存在差(cha)異，導致(zhi)可信度(du)不夠高；
Cygnus Technologies Inc.是美國的一家生(sheng)物(wu)技(ji)術(shu)公司，該公司專注于(yu)為生(sheng)物(wu)制(zhi)藥和生(sheng)物(wu)技(ji)術(shu)等(deng)企業提供(gong)高度專業化的用于(yu)研發和質(zhi)量檢測過程中的分析產(chan)品。作為公認的生(sheng)物(wu)污染物(wu)（例如(ru)宿主殘留(liu)蛋白HCP）檢(jian)測專家，Cygnus向全球客戶提供了不同種類經過嚴格驗證(zheng)和廣泛識別的(de)ELISA試劑盒(he)和免(mian)疫分(fen)析試劑。同時(shi)，作為(wei)生(sheng)物污染物分(fen)析中的(de)企業，Cygnus還可以向客戶提供(gong)專業的專屬抗(kang)體及試劑(ji)(ji)盒(he)開發(fa)和驗證等服(fu)務(wu)。具體服(fu)務(wu)項目(mu)包括試劑(ji)(ji)盒(he)適(shi)用性（抗(kang)原覆蓋率）驗證服(fu)務(wu)和專屬性試劑(ji)(ji)盒(he)開發(fa)服(fu)務(wu)。
Cygnus除了傳統的2D-WB的驗證(zheng)(zheng)服務以外，還獨家推出(chu)的更高特異性驗證(zheng)(zheng)方法，Cygnus還研發更高特異性檢測的方法：AAE（Antibody Affinity Extraction）。該(gai)方(fang)法在樣本處理(li)方(fang)式上做了非常大的(de)改(gai)進，能夠彌補(bu)2D-WB的缺陷，具(ju)有(you)更高的特(te)異(yi)性和靈敏度。
AAE新型驗證方法優勢
ü 獨特樣本(ben)處理方(fang)法(fa)：更高的(de)靈敏度和特異性
ü 可用(yong)于純化后的(de)樣本分析，真正反映試(shi)劑盒對工藝(yi)過程(cheng)中(zhong)或(huo)終產物中(zhong)殘(can)留的(de)覆蓋率
ü 可(ke)(ke)直(zhi)接通(tong)過儀器分析避(bi)免人工誤差(cha)，結(jie)果可(ke)(ke)信度更高
ü 已被多國(guo)監管(guan)機構認可，如CFDA、FDA、EMA
此(ci)外，Cygnus的(de)專(zhuan)(zhuan)利抗體(ti)生(sheng)產和親和純(chun)化(hua)技術能夠生(sheng)產出高靈敏度和廣(guang)譜反應的(de)多克隆抗體(ti)及相關試劑(ji)盒產品。還(huan)能為(wei)廣(guang)大的(de)生(sheng)物制品企業(ye)提供后續的(de)專(zhuan)(zhuan)屬檢測產品的(de)開發(fa)服務：
專屬(shu)HCP檢(jian)測抗體定制(zhi)服(fu)務
? 提供全部項目報告(gao)
? 約(yue)5~6L抗血清
? 抗體親和純(chun)化的全部技術
專屬HCP試(shi)劑盒開(kai)發(fa)服(fu)務
? 完整(zheng)的ELISA試劑盒開發及(ji)檢測(ce)報告(gao)
? 轉讓試劑盒生產(chan)工藝
? 提供試(shi)劑盒有(you)效性鑒定的技術指(zhi)導
北(bei)京西美杰科技有限公(gong)司（以(yi)下簡稱西美杰）作為Cygnus在(zai)中(zhong)國總代理(li)，在(zai)試劑盒開(kai)發和(he)驗證(zheng)服(fu)(fu)務中(zhong)可為客(ke)(ke)戶(hu)提供一站式服(fu)(fu)務，包(bao)括服(fu)(fu)務技(ji)術咨詢(xun)(xun)，樣本申報清關寄送(song)，服(fu)(fu)務進展查詢(xun)(xun)，服(fu)(fu)務報告整理(li)接收(shou)等，大(da)量節省了客(ke)(ke)戶(hu)的時間。西美杰已經(jing)成(cheng)功(gong)為中(zhong)國生物制藥多個客(ke)(ke)戶(hu)提供了滿意的HCP特異性驗證服務(wu)，助(zhu)客戶高效臨床報批一臂之力。
西美杰(jie)現貨供應——Cygnus熱銷經典試劑(ji)盒(he)
如CHO，E.coli，Pichia pastoris，Vero，293等(deng)細胞(bao)株(zhu)HCP檢測試劑(ji)盒(he)
Protein A檢測(ce)系列
DNA殘留(liu)等檢測試劑(ji)盒及相(xiang)關試劑(ji)
如您對(dui)工(gong)藝(yi)過程中的各類生物污染物檢測產品或者服務(wu)感(gan)興趣，請(qing)撥打全國服務(wu)熱線400-050-4006進行咨詢。
